色谱法

色谱系统包含相对固定的固定相，以及持续移动的流动相。样品随流动相进入系统，各组分由于吸附、分配或其他相互作用的差别，在两相中的停留行为不同，逐渐形成空间或时间上的分离。通常，与固定相相互作用更强的组分移动得更慢。

二十世纪初，植物学家茨维特把植物提取物通过装有碳酸钙的柱，用石油醚作流动相，观察到不同色素形成分开的条带。名称由此与颜色联系起来，但现代色谱不要求样品有颜色。Martin与Synge在1941年发展的分配色谱及理论，进一步把分离过程变成可分析的研究对象。

参考：[1]

气相色谱与液相色谱按流动相的物态区分；柱色谱与平面色谱则按两相接触方式区分。薄层等平面方法让流动相沿表面移动，柱方法使流动相穿过装有固定相的柱体。这些名称不能与分离机制一一画等号。

按作用机制，还可区分吸附、分配、离子交换和尺寸排阻等方式。尺寸排阻中，大分子不能进入较小孔道，可能比能深入孔道的小分子更早流出，说明“颗粒越大越慢”并非普遍规律。选择方法要考虑待测物性质及样品条件，而非只选择仪器名称。

参考：[1]

柱后检测器的响应随时间绘成色谱图。保留时间通常指从进样到某峰最大响应之间的时间；峰宽反映带展宽，两个峰能否可靠区分还取决于它们间距与宽度共同决定的分离度。仅把运行时间拉长，并不保证所有组分都能分开。

同一物质的保留行为会随柱性质和操作条件变化。理论塔板数是描述柱效的模型量，不意味着柱内真有这些小隔板。不同组分也可能共同洗脱，形成表面上单一的峰，因此峰的个数不一定等于样品所含物质的种数。

参考：[2] [3]

在适当的检测范围及校准条件下，峰面积可用于估计进入系统的待测物量。但不同物质的检测响应不必相同，进样变化和重叠峰也会影响结果；需要标准物建立校准关系，必要时利用内标修正，而不是直接把面积百分比当作质量百分比。

同条件下与标准物比较保留时间能提供鉴定线索，却不足以单独确定未知结构。联用质谱或红外检测可提供额外证据，并帮助发现峰内共洗脱。色谱首先提供分离及响应信息，可靠结论来自这些信息与校准、标准物及独立结构证据的结合。

参考：[2] [3]